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特定蛋白介绍及检测
发布时间:2020-01-15 点击量:520
   提到医学检验或体外诊断,很多人知道血常规、生化、免疫、分子......特定蛋白是什么?
  蛋白质是人体含量和种类最多的物质,占人体干重的45%,有10万多种。酶、多肽激素、细胞因子、抗体、转运蛋白、收缩蛋白等均为蛋白质,因此蛋白质被称为生命活动的物质基础。
  疾病时体内蛋白质的结构、种类、含量、分布和功能均会发生变化,以合适的方法与技术,检测体内蛋白质的改变,对疾病的诊断、病情及预后判断都有重要价值。
  对人体内蛋白质的检测方法主要有:
  ①基于蛋白质的理化特性建立的方法技术,多用于总蛋白质或某一类蛋白质测定;
  ②根据蛋白质的特有功能而建立的方法,主要用于酶等功能蛋白质测定;
  ③根据不同蛋白质的抗原性,制备相应抗体而建立的定量免疫学检测方法,广泛用于单一蛋白质准确定量测定;
  ④同时检测尽可能多低丰度蛋白质谱的芯片、蛋白组学等技术。
  特定蛋白检测
  特定蛋白(SpecificProteins),也叫做特种蛋白,特殊蛋白。利用蛋白质的抗原性,可以采用抗原-抗体反应对具有某一特定抗原性的蛋白质进行测定,故又称特定蛋白检测。专用来测定特定蛋白的仪器就称为特定蛋白分析仪。按仪器自动化程度,分为全自动和半自动特定蛋白分析仪。
  专用的特定蛋白分析仪以散射比浊方法为主,现也有一些透射比浊法(生化分析仪方法)的仪器,实际是小型的生化分析仪用来做特定蛋白。
  免疫比浊法分为免疫透射比浊法和免疫散射比浊法,两种方法学的免疫反应方法几乎相同,区别在于信号检测,透射比浊法检测的是入射光的信号强弱,散射比浊法检测的是散射光的信号强弱。检测光信号的强弱与被测物浓度有直接关系。从信号检测部件的不同就可以看出,两者的检测条件完全不同。目前以散射比浊为原理的特定蛋白分析仪已在医学检验领域普遍使用,检验人士普遍认为散射比浊法要比透射比浊法更灵敏,准确度高。
  此外,还有一些POCT的荧光免疫分析仪可以做个别项目。近几年,在全自动的化学发光分析仪上也可检测一些特定蛋白项目。
  以生化分析仪、特定蛋白仪、化学发光仪为例,需要检测物质的单位不同,导致仪器所选择的光电二级管是完全不同的。光信号通过光电二极管转换为电信号,也分为不同电流数量级。如下图所示,不同方法学在不同浓度水平的检查有自己的优势,生化分析仪主要适用于检测g/L至mg/L浓度水平的物质,散射比浊法主要适用于检测g/L至ng/L浓度水平的物质,化学发光法主要适用于检测ng/L至pg/L浓度水平的物质。
  化学发光法虽然是目前普遍认为免疫诊断里好的方法学,但其更适应检测低水平浓度的样本,对于一些浓度较高的特定蛋白需要稀释较多的倍数,这在检测中会引入更多的不确定因素。
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