PCR:合酶链反应(PolymeraseChainReaction,聚合酶链反应),利用DNA在95°C的体外解旋(变性)。在55°C下,根据碱基互补配对(退火)的原理组合引物和单链,然后将温度调节至72°C。DNA聚合酶从左到右沿着磷酸到五个碳糖(5'-3')的方向合成互补链(延伸)。PCR仪器实际上是一个温度控制设备,可以在95°C,55°C和72°C之间很好地进行温度控制。
根据DNA扩增和检测标准的目的,PCR仪器可分为:普通PCR仪器,梯度PCR仪器,原位PCR,实时荧光定量PCR仪器等。那么他俩都有什么区别?
梯度PCR仪:通常,只能在特定的退火温度下进行PCR扩增的PCR机称为普通PCR机,它也是传统的PCR机。如果要将其用于不同的退火温度,则需要多次运行。
通用PCR仪主要用于科研,教学,临床医学,检验,检疫等。如:启动步骤BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II,ABI2720型。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常为12种温度梯度),称为梯度PCR机。不同的DNA具有不同的退火温度。通过设置一系列梯度退火温度进行扩增,一次性PCR扩增可以筛选出高表达水平的合适退火温度,以进行有效扩增。
梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,节省了时间和成本,也可以在不设置梯度的情况下用作普通PCR,主要用于科研,教学机构,检验,检疫等。